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(一) 检查时期及可致病效价

1. 产前血清检查母马血清中抗体在产前1~2个月内逐渐增加,至产前20天左右为最高,因此血清检查时期应在产前20天左右。凡血清抗体效价在1:8倍及以上者,为可致病效价,应在产后立即对骡驹采取预防措施。此法适用于大群母马的普查。

2. 产前初乳检查产前初乳中抗体效价,随着产期的接近而逐渐增高,特别是产前12天剧增,因此应在产前1~2天内检查初乳。凡抗体效价为1:32及以上者,为可致病效价。应做好预防措施,生后即将驹隔离。

3_产后初乳检查产后立即挤出母马的初乳进行检查。抗体效价在1:32及以上者,即定为可致病效价。
(二) 红细胞悬浮液及检样准备

1.2%红细胞悬浮液制备试管内加适量草酸钠作抗凝剂,然后采健康驴或骡静脉血10毫升,离心后弃掉血浆,加生理盐水,再离心去上清液(重复2~3次),即成压积红细胞,保存于冰箱内,可保存数天。临用时用生理盐水配成2%红细胞悬浮液待用。

2.检样的采取和制备采取产前20天左右母马血液5?10毫升,凝固后分离血清;或采取临产前、产后初乳数毫升,待检。
(三)凝集反应实施方法及阳性标准

1. 试管法适用于血清、初乳的检查。方法是取试管数支,并标记号码。第一管加生理盐水0.3毫升,其余各管加0.2毫升。其次,向第一管加人被检血清或初乳0.1毫升,混匀后吸出0.2毫升,加于第二管内,并依次稀释至最后一管,最后弃掉0.2毫升。各管的稀释倍数分别为1:4,1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256,1:512。以上各管中.各加人2%红细胞悬浮液0.2毫升,混匀后置于37℃的温箱或水浴中1小时,即可判定结果。

判定时将试管放在光亮处观察。有凝集者管底血液边缘不整齐,无凝集者整齐。判定的主要根据是轻摇试管,观察沉积在管底的红细胞有无凝集。有凝集者为反应阳性。每管的凝集反应的程度,可按下列记号表7K:

有大凝集块,液体透明,其中几乎没有游离红细胞的,为“+++

+”。

凝块稍小,有少量游离红细胞的,为“+++”。

凝块更小,游离的红细胞较多的,为“++”。

凝块呈小颗粒状,游离红细胞更多的,为“+”。

液体中凝集颗粒不明显,红细胞很多,须在显微镜下方能判定的,为“±”。

无凝集颗粒,红细胞在液体内均匀扩散的,为“一”。

2. 离心法离心法可加速抗原与抗体的结合,因而能在很短时间内得出结果,实用价值高。方法是按试管法稀释被检査血清或初乳,添加2%红细胞悬浮液,混匀后放置感作2~5分钟。然后将各管用离心机离心1分钟,离心速度2500转/分。取出试管后按试管法判定结果。

3. 玻板法主要用于初乳检查。取试管9支,向第一管加生理盐水1.5毫升,其余均各加1毫升。再向第一管加初乳0.5毫升,混匀后取出1毫升加于第二管内,并依顺序稀释至最后一管。各管的稀释度顺

序为1:4,1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256 。另取玻板1块,划为9格,并编号。从试管内依次向各格内移1滴稀释的初乳,并分别向各格内滴加红细胞悬浮液1滴,用火柴杆从高倍开始逐格混匀,轻摇玻片后置于20℃以上的室温内约30分钟?在白纸上观察和判定。如液体清亮,内有麸皮状或细砂状颗粒者为阳性(+);液体内有均匀的红细胞,无凝集颗粒者为阴性
(一)。

关键字:测定方法及测定标准
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